3.10.2.1.1 Proteinbestimmung nach BRADFORD (1913)
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Der Farbstoff Billantblau bildet in einer Phosphorsäure-Ethanol-Lösung mit den Aminogruppen der Proteine einen gefärbten Komplex. Dabei verschiebt sich das Absorptionsmaximum des Farbstoffs von 465 nm auf 595 nm. In einem bestimmten Bereich der Proteinkonzentration ist diese somit linear proportional zur Absorption (Extinktion) bei 595 nm.
Als Vergleichsprobe wird ein Referenzprotein, meist Serumalbumin (BSA[1]), verwendet. Durch Messung unterschiedlicher BSA-Verdünnungen läßt sich eine Kalibriergerade erstellen. Durch Messung der Extinktion der Probe bei ebenfalls 595 nm läßt sich daraus die Proteinkonzentration (im Vergleich zur Vergleichprobe) ermitteln.
[1]: bovine serum albumin
