3.9.5.2 Enzymkinetik nach LINEWEAVER und BURK (1913)

Aus Biostudies
Version vom 25. November 2008, 16:50 Uhr von Webmaster (Diskussion | Beiträge)
(Unterschied) ← Nächstältere Version | Aktuelle Version (Unterschied) | Nächstjüngere Version → (Unterschied)
Zur Navigation springen Zur Suche springen
zurück

II. Molekularbiologie
3.0 Aminosäuren (α-Aminocarbonsäuren) und Proteine
3.9 Enzyme
3.9.5 Enzymkinetik
3.9.5.2 Enzymkinetik nach LINEWEAVER und BURK (1913)


Erzeugt man die Doppelreziproke der MICHAELIS-MENTEN-Gleichung und formt diese in eine Geradengleichung der Form y = m * x + t um, so erhält man die LINEWEAVER-BURK-Gleichung:

Fehler beim Erstellen des Vorschaubildes: Die Miniaturansicht konnte nicht am vorgesehenen Ort gespeichert werden

Auch in der graphischen Darstellung werden jeweils der reziproke Wert der Reaktionsgeschwindigkeit gegen die reziproke Substratkonzentration aufgetragen. Diese linearisierte Variante der MICHAELIS-MENTEN-Darstellung hat den Vorteil, daß Hemmvorgänge oder aber das Vorliegen mehrerer Substrate, zu denen u. U. das Enzym unterschiedlich große Affinität hat, leicht detektiert werden können.

Fehler beim Erstellen des Vorschaubildes: Die Miniaturansicht konnte nicht am vorgesehenen Ort gespeichert werden

Abb. 9: LINEWEAVER-BURK-Darstellung der Enzymaktivität und Auswirkung von Inhibitoren

Es wird die LINEWEAVER-BURK-Darstellung der Enzymaktivität eines Enzyms gezeigt. Bei reversibler kompetitiver Hemmung nimmt die Steigung der Geraden zu, wobei sich der y-Achsenabschnitt jedoch nicht ändert. Die dick dargestellte Gerade zeigt das Enzym ungehemmt, die normale Gerade sowie die Gestrichelte stellen unterschiedlich starke Inhibitionen dar, wobei die Inhibitorwirkung bei der gestrichelten Geraden größer ist.

Das Verhalten der Enzymwirkung und die Veränderung des LINEWEAVER-BURK-Graphen ist für eine reversible, kompetitive Hemmung in Abb. 9 dargestellt. Mit steigender Inhibitorwirkung nimmt die Steigung der Geraden bei gleichbleibendem y-Achsenabschnitt zu. Der Inhibitor kann durch das Vorliegen des Substrats im Überschuß verdrängt werde, was sich in der Darstellung dadurch zeigt, daß die Steigung des Graphen wieder abnimmt und den ursprünglichen Wert

Fehler beim Erstellen des Vorschaubildes: Die Miniaturansicht konnte nicht am vorgesehenen Ort gespeichert werden

erreicht.

Im Gegensatz dazu steigt bei der nichtkompetitiven irreversiblen Hemmung zwar wieder die Steigung an, jedoch bleibt diesmal der x-Achsenabschnitt konstant. In Gegenwart eines solchen Inhibitors ist ein Teil der Enzymmoleküle dauerhaft blockiert. Da die übrigen Enzymmoleküle die gleiche Affinität zum Substrat haben, bleibt der x-Achsenabschnitt (KM-Wert) konstant.


zurück